ІМУНОЛОГІЧНІ ПОКАЗНИКИ ОРГАНІЗМУ ТВАРИН ЗА ВПЛИВУ АЛОГЕННИХ МЕЗЕНХІМНИХ СТОВБУРОВИХ КЛІТИН КУЛЬТУРИ ЖИРОВОЇ ТКАНИНИ

Лариса Кладницька, Анатолій Мазуркевич, Гарманчук Л. В. , Микола Малюк, С. В. Величко , Тетяна Мазуркевич, Віталій Васильович Ковпак, В. Б. Данілов , Ю.О. Харкевич, Роман Бокотько, Тарас Савчук
Анотація

Дослідження проводили на самцях мишей C57BL/6 вагою 20–24 г, віком 2–3 місяці. Метою нашої роботи було вивчення функціонального стану органів імунної системи у мишей після введення алогенних мезенхімальних стовбурових клітин із жирової тканини. Маніпуляції з отримання первинного матеріалу та культивування мезенхімальних стовбурових клітин здійснювали в стерильному боксі з дотриманням усіх правил асептики й антисептики. Абдомінальну жирову тканинумишей C57BL/6 культивували у CO2 інкубаторі за температури 37 °C і 5% CO2 в середовищі DMEM, з додаванням 10–15% фетальної сироватки бичків, 1% антибіотика-антимікотика (Sigma-Aldrich, USA). Для проведення досліджень було сформовано такі групи тварин: 1 група – інтактні (контрольна група); 2 група – тварини, яким у хвостову вену вводили 0,5 см3 0,9% розчину NaCl (плацебо); 3 група – тварини, яким у хвостову вену вводили 104 алогенних мезенхімальних стовбурових клітин із жирової тканини в 0,5 см3 фосфатно-буферного розчину. Досліджували ваговий індекс, вміст лімфоїдних клітин тимусу та селезінки мишей C57BL/6 за введення мезенхімальних стовбурових клітин із жирової тканини. Для оцінювання вмісту лімфоцитів у лімфоїдних органах, останні зважували (тимус повністю), а селезінку – по 50 мг, потім розтирали та фільтрували через капронову тканину. Після цього гомогенат тканини наносили на градієнт фікол-верографіну (щільність 1,077) у співвідношенні 3:2. Пробірки з вмістом центрифугували зі швидкістю 1500 об/хв., упродовж 30–40 хв. Після центрифугування над шаромградієнта залишається плазма й лімфоцити (неменше 90%), які збирали пастерівською піпеткою і двічі відмивали довільною кількістю розчину Хенкса за допомогою центрифугування за швидкості обертання 1500–1800 об/хв. упродовж 10 хв. Після відмивання до лімфоцитів додавали 1 см3 розчину Хенкса й підраховували їхню кількість у камері Горяєва. Розрахунок клітинності лімфоїдних органів проводили на 1 мгтканини. Трансплантація алогенних мезенхімальних стовбурових клітин із жирової тканини чинить вплив на центральні й периферичні органи імунної системи. За впливу алогенних мезенхімальних стовбурових клітин із жирової тканини відбувається достовірне підвищення вмісту лімфоїдних клітинтимусунаранніхіпізніхетапахімунноївідповідіна 7, 18 та 25 добувідповіднона 71% , 57 і 53% (Р < 0,05) порівнюючи з контролем. Кількість лімфоїдних клітин у селезінці достовірно зростала на 7 та 18 добу імунної відповіді відповідно на 33% та 19%, (P <0,01, P <0,05) порівнюючи з контролемза введення алогеннихмезенхімальних стовбурових клітин, одержаних ізжировоїтканини. На 25 добу показники вмісту лімфоїдних клітинта індексу селезінки повертаються до норми. Індекси вагитимуса й селезінки прямо корелюють з вмістомлімфоїдних клітин у цих органах.

Ключові слова

миші, ваговий індекс, лімфоїдні клітини, тимус, селезінка, алогенні мезенхімальні стовбурові клітини, жирова тканина

ЦИТУВАТИ
Kladnytska, L., Mazurkevych, A., L. V. GARMANCHUK, Maliuk, M., S. V. VELYCHKO, Mazurkevych, T., Kovpak, V., V. B. DANILOV, Kharkevych, Y., Bokotko, R., & Savchuk, T. (2021). IMMUNOLOGICAL INDICATORS IN ANIMAL ORGANISMS UNDER THE INFLUENCE OF ALLOGENEIC ADIPOSE TISSUE-DERIVED MESENCHYMAL STEM CELLS. Ukrainian Journal of Veterinary Sciences, 12(2), -. https://doi.org/10.31548/ujvs2021.02.006
Використані джерела
Використані джерела в процесі публікації